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鏃ユ湡;2019-06-14  鏉ユ簮锛毼粗  浣滆咃細admin

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  胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后,作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。由于被释放的荧光基团数目和PCR产物数量是相对应关系,且荧光强度同被释放的荧光基团的数目也是正比关系,因此该可对模板进行准确定量。TaqMan探针特异性好、准确性高、假阳性低、重复性比较好。但是需要设计特异性的探针,因此成本较高。实时荧光定量PCR检测服务所使用的荧光化学材料可分为两大类,即荧光染料和荧光探针。荧光染料以SYBR GreenⅠ为主要代表,是非特异性荧光化学材料。荧光探针包括TaqMan、分子信标、荧光标记引物、杂交探针等,属于特异性荧光材料。

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  喷雾吸入,用于呼吸道疾病。也可用于毒蛇咬伤。还常用于动物细胞培养前对组织的处理。折叠按底部形状根据底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V 细胞培养板型)平底的什么类型的细胞都可用﹐但当细胞数目较少﹐如做克隆时﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等实验时﹐无论贴壁 和悬浮细胞﹐一般均用平底板。SYBR GreenⅠ是一种能够与双链DNA小沟结合的染料。在游离状态下,SYBR GreenⅠ发出微弱的荧光,但是一旦与双链DNA结合,其荧光强度大大增强。因此,一个反应发出的全部荧光信号与出现的双链DNA量成正比,可以根据荧光信号检测出PCR体系中的双链DNA的数量。V型板的用途更少﹐一般用于细胞杀伤实验时﹐为了使效靶细胞紧密接触﹐常使用V 型板﹐但这种试验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心) 如果是养细胞的话, 通常是选用平底的, 另外要注意材质,圆底的好像没听说过拿来养细胞。

  Lysozyme (溶菌酶)又称胞壁质酶(muramidase)或N-胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过细胞壁中的N-胞壁酸和N-葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,细胞壁破裂内容物逸出而使溶解。溶菌酶还可与带负电荷的蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使失活。因此,该酶具有、、抗等作用。

  其优点是检测方法简单,通用性好,价格相对较低,是许多实验室开展荧光定量实验。SYBR GreenⅠ的缺点在于它能够和所有的双链DNA相结合,因此由引物二聚体、单链二级结构、非特异性扩增产物引起的荧光信号会影响定量的准确性。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞溷合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐ 因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。 圆底的通常是拿来做分析, 化学反应, 或是保存样品用的, 因为圆底比较好将液体吸得乾净,如果用平底的就不好吸了。TaqMan探针是有美国Perkin Elmer(PE)公司研制的一种实时PCR定量,在PCR扩增加入一对引物的同时加入1个特异性的荧光探针,此荧光探针为一个30~45 bp的寡核苷酸,它设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对,其5′端标记荧光发射基团,3′端标记荧光淬灭基团。


 
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